Service Center

定量PCR
Western Blot
凝胶电泳迁移率EMSA
基因芯片
高通量测序
 
 
  Solutions For Your Research   
  English
 
相关连接
EBI
NCBI
UCSC
IHWG
GENMAPP
Nature China
北大生物信息中心
中华人民共和国科学技术部
艾普进(北京)生物技术有限公司
 
 
 
 
 
首页新闻资讯技术服务产品中心解决方案资料下载关于我们联系方式
EMSA技术服务
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)简介

       凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异), 和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

EMSA技术原理示意图

实验平台

        GENELIFE 技术服务平台采用化学发光成像仪及EMSA检测试剂盒为客户提供非放射性荧光标记探针EMSA实验。目前非常成熟的可检测因子包括:NFKB,AP1,SP1等。

适用
      1、细胞核中活化的核转录因子
      2、研究肿瘤疾病相关磷酸化的转录因子的核转位情况

委托服务流程

1、签订服务合同:由公司专业的客户服务人员与您就具体的实验情况进行沟通,确定实验方案并签订委托服务协议。
2、设计引物:根据客户提供的目的基因及物种信息,设计、合成特异的引物。并根据客户的具体研究情况选择适宜的内参基因。
3、样品处理: A、客户提供组织、细胞,公司提取核蛋白并进行蛋白浓度测定
                      B、客户提供核蛋白,公司进行蛋白浓度测定
                      C、客户提供 已知浓度的核蛋白,公司进行EMSA实验
4、EMSA实验:A、根据客户要求选择对照品和加样顺序
                        B、利用合成并标记好的荧光探针进行EMSA实验
                        C、结果进行成像分析
5、出具实验报告:包括样品质检报告、实验数据分析、实验方法及样品EMSA电泳图。

 

公司首页 | 关于我们 | 联系我们 | 信息反馈 | 帮助

 版权所有© 2005-  基莱生物科技  京ICP备05061876号