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RT-PCR技术服务
RT-PCR 技术简介

       对组织或细胞的总RNA进行抽提,把RNA反转录为cDNA,然后设计目的基因引物进行PCR,琼脂糖电泳并数码照,分析电泳条带灰度值,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。

技术原理图

实验平台

        GENELIFE 技术服务平台使用的仪器为美国Applied Biosystems公司的ABI9600型PCR仪。

适用
      1、常规DNA或RNA扩增产物的检测
      2、半定量分析特定基因的表达量
      3、酶切后进行PCR产物的分离
      4、定量PCR实验前的预试验

委托服务流程

1、签订服务合同:由公司专业的客户服务人员与您就具体的实验情况进行沟通,确定实验方案并签订委托服务协议。
2、设计引物:根据客户提供的目的基因及物种信息,设计、合成特异的引物。并根据客户的具体研究情况选择适宜的内参基因。
3、样品处理: A、客户提供组织、细胞,公司提取RNA并进行RNA的电泳检测
                       B、客户提供RNA,公司直接进行电泳检测
                       C、客户提供cDNA,公司进行内参基因的PCR检测
4、Realtime-PCR实验:A、RNA进行逆转成cDNA
                                        B、利用合成的引物进行PCR预实验,选择只有扩增出一条特异条带的引物进行正常检测
                                        C、利用Invitrogen,Promega,TIANGEN公司提供的原装试剂盒进行PCR 实验
5、出具实验报告:包括样品质检报告、实验数据分析、实验方法及样品的PCR产物电泳图。

 

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